CRISPR-Cas9介导的TRIM3基因敲除细胞系的建立及其应用
文献类型: 中文期刊
第一作者: 裴丹诗
作者: 裴丹诗;范许许;朱兆宇;王一卓;何路;任青峰;李熙忠;郑海学;李伟伟;万博
作者机构:
关键词: TRIM3;口蹄疫病毒;细胞系
期刊名称: 中国兽医科学
ISSN: 1673-4696
年卷期: 2025 年 55 卷 006 期
页码: 725-731
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 本研究旨在探究宿主蛋白TRIM3对口蹄疫病毒(FMDV)复制的影响。利用CRISPR/Cas9系统构建了TRIM3基因敲除的BHK21细胞系,并借助CCK8试剂盒检测了该基因的缺失对细胞活力的影响,结果表明,TRIM3敲除对细胞生长状态无明显影响。将FMDV分别感染野生型和TRIM3敲除型的BHK21细胞,通过Q-PCR、Western-blot和TCID50等多种方法检测FMDV在上述2株细胞中的复制情况,结果表明,TRIM3缺失能够显著抑制FMDV的复制。为了进一步验证TRIM3的表型功能,用慢病毒包装系统构建了TRIM3过表达细胞系。结果显示,过量表达TRIM3能够促进FMDV的复制。综上所述,本研究通过CRISPR/Cas9系统成功构建了TRIM3基因敲除细胞系和过表达细胞系,首次证明了TRIM3能够正向调控FMDV的复制,为后续探究TRIM3调控FMDV复制的具体机制奠定了基础。
分类号: S852.65
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