猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白原核表达及多克隆抗体的制备
文献类型: 中文期刊
第一作者: 刘欢
作者: 刘欢;姜一峰;张文超;杨莘;周艳君;黄勤锋;童光志
作者机构:
关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒;N蛋白;原核表达;多克隆抗体
期刊名称: 中国动物传染病学报
ISSN: 1674-6422
年卷期: 2017 年 25 卷 02 期
页码: 82-86
收录情况: 北大核心
摘要: 本研究将猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)HuN4株的N基因克隆至原核表达载体pCold-Ⅰ中,经IPTG诱导,在大肠杆菌中表达了重组His-N蛋白,蛋白分子量为14 kDa,能被PRRSV阳性血清特异性识别。经超声裂解和SDS-PAGE检测后,重组蛋白主要以可溶性形式表达。随后利用磁珠纯化重组蛋白,采用背部皮下多点注射免疫BALB/c小鼠,经四次免疫后获得多克隆抗体。Western blot和间接免疫荧光检测结果表明,制备的多克隆抗体具有良好的免疫反应活性,能够与真核表达或病毒的N蛋白发生特异性反应。
分类号: S852.659.6
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