鸡异质核糖核蛋白AB单克隆抗体的制备及鉴定
文献类型: 中文期刊
第一作者: 罗俊
作者: 罗俊;党露;郑鹿平;刘金玲;柴书军;赵东;杨艳艳;滕蔓
作者机构:
关键词: 鸡;异质核糖核蛋白;单克隆抗体;间接免疫荧光试验;Western blot分析;间接免疫细胞化学试验
期刊名称: 河南农业科学
ISSN: 1004-3268
年卷期: 2022 年 002 期
页码: 127-132
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为研制鸡异质核糖核蛋白AB(hnRNPAB)单克隆抗体,为其生物学功能研究提供关键试剂,构建重组质粒pET-30a-hnRNPAB,转化感受态细胞E.coli BL21,经IPTG诱导表达,并通过树脂Ni对可溶性表达的鸡hnRNPAB蛋白进行亲和层析纯化之后免疫Balb/c小鼠,利用细胞融合技术制备抗鸡hnRNPAB的单克隆抗体细胞株,最终通过间接酶联免疫吸附试验(iELISA)筛选获得1株单克隆抗体杂交瘤细胞株5H2-H1。间接免疫荧光试验(IFA)和蛋白质免疫印迹(Western blot)分析表明,5H5-H1单克隆抗体可特异性识别鸡胚成纤维细胞(CEF)表达的hnRNPAB蛋白。同时IFA和间接免疫细胞化学试验(ICA)结果还显示,除了特异性识别鸡hnRNPAB蛋白之外,5H5-H1单克隆抗体还可以与源自人、鼠、猴、牛和猪在内的5种常见哺乳动物细胞系表达的hnRNPAB发生特异性反应。
分类号: S852.4
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