鸡异质核糖核蛋白AB单克隆抗体的制备及鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 罗俊

作者： 罗俊;党露;郑鹿平;刘金玲;柴书军;赵东;杨艳艳;滕蔓

作者机构：

关键词： 鸡;异质核糖核蛋白;单克隆抗体;间接免疫荧光试验;Western blot分析;间接免疫细胞化学试验

期刊名称： 河南农业科学

ISSN： 1004-3268

年卷期： 2022 年 002 期

页码： 127-132

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研制鸡异质核糖核蛋白AB（hnRNPAB）单克隆抗体，为其生物学功能研究提供关键试剂，构建重组质粒pET-30a-hnRNPAB，转化感受态细胞E.coli BL21，经IPTG诱导表达，并通过树脂Ni对可溶性表达的鸡hnRNPAB蛋白进行亲和层析纯化之后免疫Balb/c小鼠，利用细胞融合技术制备抗鸡hnRNPAB的单克隆抗体细胞株，最终通过间接酶联免疫吸附试验（iELISA）筛选获得1株单克隆抗体杂交瘤细胞株5H2-H1。间接免疫荧光试验（IFA）和蛋白质免疫印迹（Western blot）分析表明，5H5-H1单克隆抗体可特异性识别鸡胚成纤维细胞（CEF）表达的hnRNPAB蛋白。同时IFA和间接免疫细胞化学试验（ICA）结果还显示，除了特异性识别鸡hnRNPAB蛋白之外，5H5-H1单克隆抗体还可以与源自人、鼠、猴、牛和猪在内的5种常见哺乳动物细胞系表达的hnRNPAB发生特异性反应。

分类号： S852.4

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