猪细小病毒4型单克隆抗体制备及抗原表位鉴定
文献类型: 中文期刊
第一作者: 柴书军
作者: 柴书军;杨苏珍;刘运超;冯华;魏蔷;王方雨;金前跃;张改平
作者机构:
关键词: 猪细小病毒4型;单克隆抗体;抗原表位
期刊名称: 畜牧与兽医
ISSN: 0529-5130
年卷期: 2024 年 008 期
页码: 77-84
收录情况: 北大核心
摘要: 为了制备猪细小病毒(PPV)4型Cap蛋白单克隆抗体(mAb)并鉴定其抗原表位,试验采用原核表达的Cap重组蛋白免疫BALB/c小鼠,将其脾细胞与SP2/0细胞进行融合,通过酶联免疫吸附测定(ELISA)、血凝抑制(HI)和免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)筛选阳性克隆,最终获得2E7、4D6和5C9这3株特异性杂交瘤细胞株;然后用mAb对Cap蛋白多肽进行ELISA检测,鉴定分析其抗原表位。结果显示:4D6和5C9 mAb识别表位为线性表位,分别为 387RRQDN391和578QRKE581,而2E7 mAb识别的表位为构象表位;通过对Cap蛋白3D结构定位分析,387RRQDN391和578QRKE581抗原表位位于蛋白表面,且在PPV4亚型中高度保守,而与猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)和猪博卡病毒(PBoV)基因序列同源性低。本研究为PPV4诊断试剂的开发和新型疫苗的研制提供了参考。
分类号: S852.4
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