基于CRISPR/Cas9系统构建NCOA4敲除的MARC-145细胞系及其对HP-PRRSV复制的影响

文献类型： 中文期刊

第一作者： 官凯锋

作者： 官凯锋;袁晨阳;吕镕州;张改平

作者机构：

关键词： CRISPR/Cas9;NCOA4;铁自噬;猪繁殖与呼吸综合征;基因敲除;细胞活性

期刊名称： 华中农业大学学报

ISSN： 1000-2421

年卷期： 2025 年 44 卷 005 期

页码： 134-141

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为探究NCOA4介导的铁自噬在PRRSV感染中的作用,利用CRISPR/Cas9技术在PRRSV易感的MARC-145细胞中敲除铁自噬的关键受体NCOA4基因,并结合Sanger测序和Western blot检测NCOA4的敲除效率.同时运用流式细胞术、qPCR、Western blot、TCID50等对NCOA4缺失型和野生型MARC-145进行细胞周期、细胞活性检测,以及检测NCOA4缺失对PRRSV复制的影响.结果显示,本研究成功构建NCOA4基因敲除的MARC-145细胞系.此外,相比于野生型MARC-145细胞系,敲除NCOA4显著增加PRRSV ORF7 mRNA、N蛋白及病毒滴度水平,同时促进FTH 1蛋白表达.结果表明,铁自噬的关键受体基因NCOA4缺失能促进PRRSV复制.

分类号： S852.651

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