重组酶介导等温核酸扩增结合核酸试纸条即时检测猪流行性腹泻病毒方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 易玮婕

作者： 易玮婕;李嘉豪;赵伊然;单衍可;刘斐

作者机构：

关键词： 猪流行性腹泻病毒;重组酶介导等温核酸扩增技术;现场快速检测

期刊名称： 病毒学报

ISSN： 1000-8721

年卷期： 2024 年 40 卷 005 期

页码： 1054-1061

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本文旨在建立一种基于重组酶介导等温扩增技术（Recombinase aided amplification, RAA）结合核酸试纸条的猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV）可视化检测方法，以应用于养殖场内部实现现场快速检测。选择PEDV N基因保守序列为模板，设计特异性引物及荧光探针，对引物进行对比筛选，对反应条件、引物浓度、探针浓度进行优化，并对其特异性、敏感性和重复性进行评价。将建立的检测方法应用于临床样品，并与荧光定量PCR方法进行比较。结果表明：建立的方法在38℃恒温10 min扩增反应以及5 min侧流向层析后，即可完成检测，与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型、猪德尔塔冠状病毒、猪轮状病毒、猪传染性胃肠炎病毒均无交叉反应，最低检测限可达101拷贝/μL。应用该方法检测20份阴性和20份阳性，共40份临床样本，检测结果与荧光定量PCR方法保持一致。本研究建立的RAA结合核酸试纸条的方法具有特异性好、灵敏度高、耗时短、仪器设备简便等优点，适用于基层现场快速检测。

分类号： S858.28

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