重组葡萄糖氧化酶毕赤酵母高产菌株的高通量快速筛选方法

文献类型： 中文期刊

第一作者： 周利伟

作者： 周利伟;郜赵伟;张宇宏;张伟

作者机构：

关键词： 葡萄糖氧化酶;高通量筛选;毕赤酵母

期刊名称： 中国农学通报

ISSN： 1000-6850

年卷期： 2012 年 28 卷 21 期

页码： 183-188

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了建立一种高通量快速筛选重组葡萄糖氧化酶(GOD)毕赤酵母高产菌株的方法,转god基因毕赤酵母重组子在MM平板上培养,经甲醇诱导培养2天后在平板上覆盖显色液,室温显色30min,测定棕色圈直径并计算面积,然后评估棕色圈面积与GOD活力的相关性。室温显色30min后,当样品的GOD活力大于0.0005U时,平板上可观察到明显的棕色圈;经过与传统液体培养筛选方法的比较验证,该平板筛选方法灵敏度高,稳定性和重复性好,筛选结果与传统方法一致;并且当毕赤酵母重组子表达的GOD活力介于0～0.1U/mL的范围内时,显色圈的绝对面积与GOD活力相关系数可达0.63。本研究成功地建立了一种转葡萄糖氧化酶基因毕赤酵母重组菌株的高通量快速筛选方法。

分类号： TQ925

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