IC-RT-PCR检测葡萄卷叶病毒Ⅲ的研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈建军

作者： 陈建军;曹香林;古勤生;张亚冰;刘崇怀

作者机构：

关键词： 葡萄;卷叶病毒Ⅲ;检测;IC-RT-PCR

期刊名称： 河南农业科学

ISSN： 1004-3268

年卷期： 2006 年 2006 卷 08 期

页码： 111-114

收录情况： 北大核心

摘要： 结合ELISA和反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的特点,引入了另外一种方法,即免疫捕捉反转录聚合酶链式反应(IC-RT-PCR)对葡萄卷叶病毒Ⅲ(GLRaV-3)进行了检测。从免疫捕捉病毒、释放RNA到反转录成cDNA,最后扩增出了约300bp的预期目的片段。为了进一步明确PCR扩增的特异性,将PCR产物连接到pGEM-T载体上,转化大肠杆菌E.coliJM109菌株,通过蓝白斑筛选,获得重组质粒,提取质粒DNA,经酶切对重组质粒进行鉴定,结果得到了含有目的片段的重组质粒。由此证明,IC-RT-PCR检测GLRaV-3结果准确可靠。最重要的是它弥补了ELISA易出现假阴性、假阳性以及RT-PCR提取RNA难等的缺点,不失为病毒检测的新型方法。

分类号： S436.631

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