体细胞核移植生产转ω-3脂肪酸去饱和酶基因sFat-1克隆猪

文献类型： 中文期刊

第一作者： 潘登科

作者： 潘登科;张莉;周艳荣;冯冲;龙川;刘晓;董恩球;王树臣;万荣;张健;陈红星

作者机构：

关键词： 体细胞核移植;ω-3脂肪酸去饱和酶基因;排卵状况;转基因猪

期刊名称： 中国科学(C辑:生命科学)

ISSN： 1006-9259

年卷期： 2009 年 03 期

页码： 295-302

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 转ω-3脂肪酸去饱和酶基因猪在优质猪培育及研究ω-3不饱和脂肪酸预防心血管和癌症疾病中的作用方面有着重大的应用.本研究首次通过体细胞核移植制备了转线虫ω-3脂肪酸去饱和酶基因sFat-1猪.将sFat-1基因转染到大白猪胎儿成纤维细胞,获得转基因阳性细胞克隆,然后以转基因细胞为核供体、体外成熟的猪卵母细胞为核受体构建克隆胚胎,胚胎体外培养或进行移植.先后移植了1889枚1~4细胞期克隆胚胎到10头受体母猪的输卵管内,28天B超检测9头受体母猪妊娠(90%),7头妊娠足月(70%)分娩产下21头仔猪,体细胞克隆猪的效率为1.1%(出生仔猪/移植胚胎).体细胞克隆猪效率的提高,主要是对克隆胚胎的移植环节进行了改进,比较了受体母猪排卵状况对胚胎移植效率的影响.当受体母猪卵泡发育处于即将排卵或正在排卵阶段,能够获得较高的妊娠率和妊娠足月率(100%),而排卵后移植妊娠足月率为0%.对健康存活15头克隆猪进行了PCR和Southern检测,证实13头为转基因猪,转基因阳性率为87%.RT-PCR检测13头转基因猪,12头表达sFat-1基因.以上结果表明,利用优化的体细胞转基因结合核移植技术,可以成功地批量生产转sFat-1基因的克隆猪.

分类号： Q813

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