文献类型： 中文期刊
第一作者： 邵文华
作者： 邵文华;付磊;荆婷婷;唐军林;孙延鸣;储岳峰
作者机构：
关键词： 牛支原体;recA;原核表达;重组酶活性
期刊名称： 中国兽医科学
ISSN： 1673-4696
年卷期： 2022 年 52 卷 002 期
页码： 197-204
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为了确定牛支原体recA是否也具有介导DNA重组的活性,从牛支原体PG45菌株基因组中克隆recA基因片段,构建至原核表达质粒pET-28a中,摸索表达条件,采用Ni-NTA树脂纯化而获得纯度较高的重组recA蛋白,并进行DNA重组酶活性试验.结果表明,重组蛋白以可溶性表达的最优条件为16℃、800 μmol/L IPTG、诱导30 h;而DNA重组酶活性试验结果表明,重组的牛支原体recA蛋白具有介导同源DNA重组酶活性.这将为构建牛支原体高效的定向遗传操作系统、探究re cA基因在牛支原体DNA损伤修复中的生物学功能和机制等奠定基础.
分类号： S852.62
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