牛型布氏杆菌GroEL的克隆表达及其生物学特性研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 韩先干

作者： 韩先干;何随彬;胡青海;丁铲;于圣青

作者机构：

关键词： 布氏杆菌;GroEL;表达;酶活检测

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2010 年 18 卷 05 期

页码： 27-31

摘要： 根据已发表的牛型布氏杆菌(Brucella abrotus)基因序列设计一对特异性引物,以B.abrotusA19株基因组为模板,通过PCR扩增GroEL基因,经T-A克隆后进行序列测定和分析。结果表明,GroEL基因全长1 641bp,编码546个氨基酸。将GroEL定向克隆至表达载体pET32a中,构建重组表达质粒pET32a-LGroEL,然后转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下成功获得重组表达蛋白His-GroEL,大小为81 kDa。经Western blot检测,牛布氏杆菌阳性血清中有GroEL抗体存在,表明该蛋白具有免疫原性。对重组表达蛋白His-GroEL进行酶促活性检测,结果表明该蛋白在体外具有催化ATP水解的酶活性和促进乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)复性的功能。

分类号： S852.61

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