三重PCR检测茄子青枯病菌、黄萎病菌和白绢病菌

文献类型： 中文期刊

第一作者： 邹芬

作者： 邹芬;何烈干;李湘民;黄瑞荣;马辉刚

作者机构：

关键词： 茄子;土传病害;三重PCR;青枯病菌;黄萎病菌;白绢病菌

期刊名称： 植物保护学报

ISSN： 0577-7518

年卷期： 2023 年 001 期

页码： 206-213

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为快速、准确对田间茄子发病植株和土壤中3种土传病害的病原菌青枯病菌Ralstonia solanacearum、黄萎病菌Verticillium dahliae和白绢病菌Sclerotium rolfsii进行检测，筛选这3种病菌的特异性引物，建立这3种病菌的三重PCR检测体系，对其退火温度、引物浓度、10×PCR Buffer（Mg2+plus）、dNTP和Taq DNA聚合酶进行优化，对优化后体系的特异性和灵敏度进行检测，并利用优化体系对田间采集的病害样品和土壤样品进行检测。结果表明，在优化后的50μL三重PCR检测体系中，RS-1-F/RS-3-R、dllz1/dllz2和SRITSF/SRITSR引物的最佳浓度分别为0.16、0.16和0.28μmol/L,10×PCR Buffer（Mg2+plus）、dNTP和Taq DNA聚合酶体积分别为6、5和1μL，检测体系的最佳退火温度为54℃。按照优化后的反应条件能分别扩增出青枯病菌、黄萎病菌和白绢病菌3种病菌的特异条带，分别为716、350和500 bp，其他对照病菌无条带。该体系对病菌DNA检测灵敏度达到0.1 ng/μL。该检测体系对田间采集的病害样品和土壤样品中病菌的检出率达95%以上。

分类号： S436.411

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