抗猪流感病毒单链抗体的原核表达及活性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 蒋蔚

作者： 蒋蔚;刘迎春;陈永军;杨康;王权

作者机构：

关键词： 猪流感病毒;单链抗体;原核表达;复性;活性

期刊名称： 畜牧与兽医

ISSN： 0529-5130

年卷期： 2015 年 47 卷 02 期

页码： 1-5

收录情况： 北大核心

摘要： 为了深入研究抗猪流感病毒(SIV)单链抗体(scF v)的功能,以及抗体的放大生产和应用,在获得特异性抗体SIV scF v编码基因的基础上,建立该单链抗体的原核高效表达体系,并对表达产物进行复性纯化和活性测定。通过PCR从重组噬粒中扩增抗scF v基因,将其克隆到原核表达载体p ET28a(+)中后,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞并诱导表达。SDS-PAGE和Western blot分析表明重组scF v主要以包涵体形式表达,经过复性和纯化可获得可溶性的重组scF v,分子质量约为33 ku。间接ELISA和阻断ELISA表明,复性后的scF v与包被在酶标板上的SIV具有特异的结合反应,且具有浓度依赖性。重组scF v可以与其他2株SIV国内分离株特异性结合,提示重组scF v可能针对的是该病毒的保守区域。本研究成功获得了具有中和H1N1猪流感病毒活性的重组抗SIV scF v,为深入研究其功能以及进行大规模生产应用提供依据。

分类号： S852.65

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