猪圆环病毒2型GD株ORF2基因重组腺病毒的构建及其表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 宋长绪

作者： 宋长绪;蒋智勇;王贵平;高向阳;赵亚华

作者机构：

关键词： 猪圆环病毒2型;ORF2基因;重组腺病毒

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2005 年 27 卷 05 期

页码： 348-351

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据PCV2 ORF2基因的序列设计两条引物从PCV2的PK15细胞培养物中扩增出ORF2基因(702 bp)。将此基因片段克隆入pMD 18_T载体,经酶切、测序鉴定筛选出重组质粒pMD_ORF2。将PCV2 ORF2基因克隆入pAdeasy腺病毒载体系统的穿梭质粒pAdTrack_CMV中,获得重组穿梭质粒pAdTrack_CMV_ORF2,将重组质粒与腺病毒骨架载体共转化大肠杆菌BJ5183,通过细菌内同源重组获得重组腺病毒质粒pAdCMV_ORF2,然后用PacⅠ线性化后转染293细胞,在293细胞内包装出重组腺病毒。通过荧光显微镜观察、PCR检测和Western blot检测证明PCV2 ORF2基因在293细胞内获得表达,ORF2多肽具有良好的免疫原性。

分类号： S852.65

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