猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白胞外区的串联表达及免疫原性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 金前跃

作者： 金前跃;王寅彪;冯丽丽;李华玮;郭振华;邢广旭;张改平

作者机构： 河南省农业科学院;新乡医学院公共卫生学系;河南省农业科学院农业经济与信息研究所;河南牧业经济学院动物医药学院;河南省农业科学院动物免疫学重点实验室

关键词： PRRSV-GP5胞外区;串联表达;免疫原性分析

期刊名称： 现代牧业

ISSN： 1008-3111

年卷期： 2021 年 5 卷 001 期

页码： 1-5,26

摘要： 为建立基于GP5蛋白的PRRSV中和抗体检测方法,本实验通过基因合成技术将GP5蛋白的胞外区(GP5-ecto)进行串联合成,并将该串联基因克隆到pET28a载体上,在37℃培养含重组质粒pET28a-GP5-ecto的E.coli BL21(DE3)细胞至OD600值为0.6~1.0时,以终浓度为0.5 mM的IPTG诱导4 h后,重组GP5-ecto蛋白实现了高效表达.Western blot证实GP5-ecto蛋白能与PRRSV阳性猪血清发生特异性反应.Ni-NTA亲和层析纯化后,间接ELISA证实1:400倍稀释的PRRSV阳性猪血清可检测到低至0.125μg/ml的GP5-ecto蛋白,表明GP5-ecto蛋白具有良好免疫原性.IFA试验证实GP5-ecto蛋白免疫BALB/c小鼠后获得的鼠血清能与天然PRRSV发生反应,说明重组蛋白与病毒天然蛋白的结构具有较高的相似性.本研究获得的GP5-ecto纯化蛋白,为PRRSV中和抗体ELISA检测方法的建立提供了材料.

分类号： S852.65

  • 相关文献

[1]PRRSV N与GP5蛋白抗原表位的串联表达及其间接ELISA检测方法的建立. 陈如敬,周伦江,吴学敏,车勇良,王晨燕,王隆柏,黄晓凤,严山,刘玉涛,魏宏. 2017

[2]猪口蹄疫O型合成肽疫苗抗原多肽的串联表达及活性鉴定. 卢清侠,郭军庆,郝慧芳,杨苏珍,邢广旭,杨继飞,王世红,张改平. 2011

[3]miRNA表达载体的构建与抑制禽流感病毒(AIV)复制的研究. 孟庆文,刘丹,秦红刚,李文超,曲连东. 2008

[4]鸭肠炎病毒糖蛋白gB-gD主要抗原域的串联表达. 王雅静,郭东春,刘家森,王淑亚,原冬伟,姜骞,林欢,司昌德,曲连东. 2013

[5]细粒棘球蚴Eg95s基因的串联表达及表达系统优化. 刘丹,贾红,侯绍华,丁敏,朱鸿飞. 2009

[6]牛冠状病毒S蛋白抗原表位基因的串联表达及抗血清制备. 程凯慧,沈付娆,邹积振,朱彤,苗自利,张亮,解晓莉,杨宏军,何洪彬. 2018

[7]鸭坦布苏病毒抗体间接ELISA检测方法的建立和应用. 余斌,华炯钢,刘跃生,赵灵燕,倪征,叶伟成,云涛,陈柳,徐辉. 2014

[8]新型伪狂犬病病毒gB、gC蛋白串联表达及免疫活性分析. 吴学敏,陈如敬,陈秋勇,王隆柏,车勇良,严山,刘玉涛,周伦江. 2022

[9]口蹄疫病毒结构蛋白VP1与细胞间黏附分子ICAM-2重组融合蛋白的表达及免疫原性分析. 芦延珍,刘新生,周鹏,方玉珍,张永光,刘霞,王永录,杜晓华. 2017

[10]猪O型口蹄疫基因工程疫苗候选株的构建及其免疫原性分析. 李平花,白兴文,孙普,李冬,卢曾军,包慧芳,曹轶梅,付元芳,陈应理,谢宝霞,殷宏,刘在新. 2011

[11]猪流行性腹泻病毒纤突蛋白受体结合区(PEDV-RBD)重组蛋白的免疫原性. 伊立超,郝嘉翼,邹万成,李乐天,姜宇航,张爽,娄安钢,李昌,金宁一. 2023

[12]Asia1型口蹄疫病毒空衣壳在毕赤酵母中的表达及免疫原性分析. 王芳,王海伟,于力. 2009

[13]柔嫩艾美耳球虫蛋白质二硫键异构酶基因的克隆、表达及免疫原性分析. 韩红玉,黄兵,林矫矫,赵其平,董辉,姜连连,徐梅倩,朱顺海. 2009

[14]坏死梭杆菌120ku血凝素相关外膜蛋白的原核表达及免疫原性分析. 吴洪超,刘晓颖,冯二凯,朱言柱,万洪理,冯卓,闫喜军,陈立志. 2015

[15]微小牛蜱4D8基因原核表达及免疫原性分析. 刘军龙,关贵全,李有全,马米玲,刘爱红,任巧云,殷宏,罗建勋. 2009

[16]牛流行热病毒糖蛋白基因的原核表达与抗原性鉴定. 李志,郑福英,高闪电,王素艳,岳城,殷宏. 2015

[17]布鲁氏菌SUMO-BCSP31重组表达菌的构建及免疫原性分析. 杨艳玲,郭利,王建科,孙娜,温永俊. 2013

[18]新型鸭呼肠孤病毒病灭活疫苗的制备及免疫原性分析. 陈仕龙,李兆龙,林锋强,王劭,程晓霞,朱小丽,陈少莺. 2012

[19]新发猪伪狂犬病病原致病性及免疫原性分析. 童光志,童武,郑浩,刘飞,梁超,李国新. 2014

作者其他论文 更多>>

微信小程序