敲低3-磷酸甘油酸脱氢酶靶向能量代谢逆转骨肉瘤恶性生物学的行为

文献类型： 中文期刊

第一作者： 周红

作者： 周红;康权;谢圣男;陈洁;石雨鹭;罗庆

作者机构：

关键词： 3-磷酸甘油酸脱氢酶;能量代谢;骨肉瘤;成骨分化;实时定量聚合酶链反应;人

期刊名称： 解剖学报

ISSN： 0529-1356

年卷期： 2022 年 004 期

页码： 488-497

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的 探讨敲低3-磷酸甘油酸脱氢酶（PHGDH）靶向能量代谢对人骨肉瘤143B细胞恶性生物学行为及成骨分化的影响。方法 Real-time PCR及Western blotting检测PHGDH在成骨细胞hFOB1.19和不同恶性程度骨肉瘤细胞TE85、MG63、143B中的表达。采用脂质体转染法将短发夹RNA（shRNA）-PHGDH重组质粒转染至143B细胞中，Real-time PCR和Western blotting检测PHGDH的表达变化；结晶紫染色法、细胞计数法、CCK-8实验检测细胞增殖；划痕实验检测细胞平行迁移能力，Transwell实验检测细胞垂直迁移及侵袭能力；Annexin V-FITC/PI双染法、DAPI染色法检测细胞凋亡；碱性磷酸酶（ALP）染色和茜素红S染色检测成骨分化作用，Western blotting检测成骨分化指标Runt相关转录因子2（Runx2）、骨钙素（OC）的表达情况；Real-time PCR检测能量代谢相关基因葡萄糖转运蛋白1(（GLUT1）、6-磷酸果糖激酶1（PFK1）、M2型丙酮酸激酶（PKM2）、乳酸脱氢酶A（LDHA）的表达，乳酸检测试剂盒测定乳酸分泌量，三磷酸腺苷（ATP）检测试剂盒检测ATP产生量。结果 PHGDH在143B细胞中的表达明显高于在hFOB1.19、MG63和TE85细胞中（P<0.01）;转染shRNA-PHGDH重组质粒使143B细胞中的PHGDH表达量降低（P<0.01）、增殖能力降低（P<0.01）、细胞迁移及侵袭能力减低（P<0.01）、凋亡率增高（P<0.01）、ALP染色阳性率增加（P<0.01）、茜素红染色阳性率增加（P<0.05）、Runx2（P<0.05）和OC的表达增高（P<0.01）、能量代谢相关基因（GLUT1、PFK1、PKM2、LDHA）的表达下调（P<0.01）、乳酸减少（P<0.01）、ATP增多（P<0.05）。结论 敲低PHGDH可通过能量代谢抑制人骨肉瘤143B细胞增殖、迁移、侵袭，促进其凋亡，并促进其成骨分化。

分类号： R738.1

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