CHO细胞表达重组猪干扰素-γ及其抗病毒活性

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王凌云

作者： 王凌云;郝荣增;杨洋;李亚军;卢炳州;毛玉涵;张越;龚真莉;刘艳红;齐萌;茹毅;郑海学

作者机构：

关键词： 猪干扰素-γ;塞内卡病毒A;中国仓鼠卵巢（CHO）细胞;蛋白表达与纯化;抗病毒活性

期刊名称： 生物工程学报

ISSN：

年卷期： 2023 年 012 期

页码： 4784-4795

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为利用中国仓鼠卵巢（Chinese hamster ovarian,CHO）细胞表达系统制备重组猪干扰素-γ（recombinant porcine interferon gamma,r Po IFN-γ），并分析其体外抗病毒活性，本研究首先构建r Po IFN-γ真核表达质粒pc DNA3.1-Po IFN-γ，转染悬浮培养的CHO细胞，进行上清分泌表达，利用亲和层析纯化目的蛋白，并进行SDS-PAGE和Western blotting鉴定；通过CCK-8实验分析r Po IFN-γ对细胞的毒性，用VSV/PK-15系统检测其抗病毒活性效价；最后分析r Po IFN-γ对塞内卡病毒A （Seneca virus A,SVA）的抗病毒活性及其对细胞内干扰素刺激基因（interferon-stimulated genes,ISGs）和细胞因子的诱导作用。结果显示，本研究利用CHO悬浮细胞表达系统成功制备了纯化的r Po IFN-γ，该r Po IFN-γ对细胞无毒性，VSV/PK-15系统检测其活性效价为5.59×107 U/mg；此外，r Po IFN-γ可诱导细胞内多种ISGs和细胞因子的表达，并显著抑制SVA的复制。总之，本研究成功利用CHO表达系统制备了高活性的r Po IFN-γ，并在体外完成其对SVA的抗病毒作用分析，为r Po IFN-γ的功能及抗病毒制剂的研究提供了实验材料和基础。

分类号： R285.5

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