豇豆疫霉LAMP检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李本金

作者： 李本金;刘小丽;刘裴清;王荣波;翁启勇;陈庆河

作者机构：

关键词： 豇豆疫霉;内转录间隔区(ITS);环介导等温扩增技术(LAMP);分子检测

期刊名称： 植物保护

ISSN： 0529-1542

年卷期： 2018 年 04 期

页码： 119-124

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究以豇豆疫霉Phytophthora vignae Purss核糖体内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)序列为靶标片段,设计4条特异性引物,建立了环介导等温扩增(LAMP)检测方法。特异性检测结果表明:8株不同地理来源的豇豆疫霉菌株LAMP检测均为阳性(绿色),扩增产物用2.0%琼脂糖凝胶电泳出现特有的梯形条带,而其他11种卵菌近缘种及12种常见病原真菌和细菌共42个菌株均未观察到这些现象。灵敏度分析显示:该方法检测灵敏度在DNA水平上可达到100fg/25μL。采用LAMP方法对福建建瓯和宁德采集的62份疑似豇豆疫病病株样本进行检测,并用组织分离方法进行验证。结果表明,LAMP和组织分离方法的检出率分别为67.7%(42/62)和61.3%(38/62)。综合以上结果,LAMP方法具有特异性强、灵敏度高、快速高效、操作简单的特点,适合基层部门用于田间豇豆疫霉快速检测。

分类号： S436.43

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