鸡贫血病毒衣壳蛋白的表达纯化及多克隆抗体制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王晓艳

作者： 王晓艳;文刚;高玉龙;高宏雷;王笑梅

作者机构：

关键词： 鸡贫血病毒;衣壳蛋白;表达;纯化;多克隆抗体

期刊名称： 中国病毒学

ISSN： 1003-5125

年卷期： 2006 年 21 卷 005 期

页码： 477-480

收录情况： CSCD

摘要： 利用PCR技术,以PPRPO-VP1为模板扩增得到鸡贫血病毒的衣壳蛋白基因(VP1),以T4多聚核苷酸激酶磷酸化处理、纯化后,克隆至表达载体PET-30A(+) 中,从而构建了原核表达质粒PET30-VP1.将PET30-VP1转化至感受态细胞E.COLI BL21(DE3)中,经IPTG诱导后,SDS-PAGE分析,可见约45KDA的目的蛋白获得表达.该蛋白经亲和层析纯化后,免疫6-8W的雌性BALB/C鼠,三次免疫后,采血分离血清,制得抗VP1的多克隆血清.以纯化的VP1为包被抗原,用ELISA方法检测,制备的血清效价达12800*以上.以WESTERN BLOT 检测,该血清可与目的蛋白发生特异性反应,证明其具有良好的免疫原性.VP1蛋白的成功表达及其多克隆抗体的制备为进一步研究VP1蛋白的功能及开展CAV疫苗及诊断制剂的研制奠定了基础.

分类号： S8

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