一种优化的猪卵泡颗粒细胞分离方法及验证

文献类型： 中文期刊

第一作者： 曲小露

作者： 曲小露;施振旦;李辉

作者机构：

关键词： 颗粒细胞;FICOLL-Paque;细胞增殖;孕酮;免疫荧光染色;FSH受体

期刊名称： 江苏农业科学

ISSN： 1002-1302

年卷期： 2019 年 23 期

页码： 190-194

摘要： 目前,进行体外研究的卵泡颗粒细胞主要通过抽取卵泡液的方式获得。而笔者前期研究发现,通过该方式获得的颗粒细胞贴壁率低且活力差。为解决该问题,在抽取方式的基础上采用FICOLL-Paque分离液对细胞进行进一步纯化,并通过CCK-8、Western Blot、免疫荧光染色、QRT-PCR、ELISA等方法分别对纯化细胞的形态、增殖能力、激素分泌相关受体(FSHR、LHCGR)和基因(CYP19A1、CYP11A1、StAR)的表达及激素分泌情况进行检测。结果发现,经纯化的细胞贴壁能力、细胞形态和增殖能力明显改善,且各激素分泌相关基因都有表达;E2分泌量明显提高,而P4分泌明显降低。研究结果表明,经FICOLL-Paque分离液纯化后的猪卵泡颗粒细胞中黄体化的颗粒细胞被大部分清除,纯化后的细胞活力更好且更能体现出颗粒细胞的特性。

分类号： S828.3

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