中国株马传染性贫血病病毒S2基因的原核表达及其多克隆抗体制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 高华

作者： 高华;高旭;姜成刚;赵立平;马学恩;周建华

作者机构：

关键词： 马传染性贫血病毒;S2基因;原核表达;多克隆抗体

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2009 年 31 卷 07 期

页码： 563-567

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本实验为表达马传染性贫血病病毒(EIAV)S2蛋白和制备其抗血清,以EIAV感染性分子克隆pFDDV3-8为模板扩增S2基因,将其克隆于pMD18-T载体中,测序验证后,将S2基因亚克隆于pET-30a表达载体,构建S2基因的重组表达质粒(pET-EIAV-S2),并转化DH5α受体菌。以终浓度为0.6mmol/L的IPTG诱导,表达的重组蛋白约20ku。Westernblot分析表明,该蛋白可与EIAV的阳性血清反应,具有免疫原性。该重组蛋白通过镍离子亲和层析进行纯化后,免疫新西兰兔。ELISA及westernblot分析表明,制备的兔多克隆抗体与EIAV的S2蛋白发生特异性反应。EIAVS2蛋白的重组表达及其抗体的制备为进一步研究S2辅助蛋白在EIAV复制与致病中的作用,以及S2基因反向遗传研究奠定了基础。

分类号： S852.659.6

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