鸭腺病毒3型Fiber-2蛋白单克隆抗体的制备及初步应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 魏常青

作者： 魏常青;史馨瑾;吕璐;刘英楠;谢振华;陈宗艳;陈鸿军

作者机构：

关键词： DAdV-3;Fiber-2;单克隆抗体

期刊名称： 中国家禽

ISSN： 1004-6364

年卷期： 2023 年 45 卷 002 期

页码： 46-51

收录情况： 北大核心

摘要： 为进一步研究鸭腺病毒3型(DAdV-3)Fiber-2蛋白,研究通过PCR扩增fiber-2基因,构建pET32a-DAdV3-fiber2原核质粒,表达并纯化蛋白,以纯化的蛋白为免疫原,免疫6周龄雌性BALB/c小鼠制备抗Fiber-2单克隆抗体杂交瘤细胞,采用间接免疫荧光试验和免疫印迹试验进行鉴定,并用于DAdV-3 Fiber-2杆状病毒表达产物的鉴定.结果显示:原核表达获得1.77 mg/mL Fiber-2蛋白,筛选获得2株阳性单克隆细胞株2E10E4和4F7F10,两株单克隆抗体均为IgG1型,轻链类型为κ;DAdV-3感染的LMH细胞中存在特异性荧光,免疫印迹试验确认在约59 ku处出现特异性条带;采用制备的单克隆抗体确认了表达Fiber-2蛋白的重组杆状病毒.研究获得了针对DAdV-3 Fiber-2蛋白的单克隆抗体,为深入探究Fiber-2在DAdV-3感染机制中的作用以及为建立DAdV-3抗原免疫测定技术奠定了基础.

分类号： S855.3

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