茄子U6启动子克隆及CRISPR/Cas9介导的基因编辑体系建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王丹

作者： 王丹;王谧;刘军;周晓慧;刘松瑜;杨艳;庄勇

作者机构： 南京农业大学园艺学院;江苏省农业科学院蔬菜研究所

关键词： 茄子;U6启动子;CRISPR/Cas9;基因编辑

期刊名称： 园艺学报

ISSN： 0513-353X

年卷期： 2022 年 49 卷 004 期

页码： 791-800

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用拟南芥(Arabidopsis thaliana)U6RNA保守序列从茄子(Solanum melongena L.)基因组中鉴定到7个U6 RNA,并采用PCR技术成功克隆其启动子序列.GUS染色结果表明4个茄子U6启动子(SmU6-1P、SmU6-2P、SmU6-4P 和 SmU6-7P)具有转录活性.构建以 SmU6-1P/AtU6-P 驱动 SmWRKY4 sgRNA的CRISPR/Cas9基因编辑载体,通过农杆菌介导侵染茄子子叶外植体得到T0代植株.以T0代植株的DNA为模板扩增WRKY4片段并对产物测序,测序结果显示以SmU6-1P构建的CRISPR/Cas9载体能靶向编辑SmWRKY4,编辑率为27.0%.在基于AtU6-P的T0代植株中未检测到碱基突变,表明在茄子遗传转化中,茄子SmU6启动子编辑效率高于拟南芥AtU6启动子.

分类号： S641.1

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