H1N1亚型猪流感病毒HA1基因原核表达及鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 阮宝阳

作者： 阮宝阳;王林;宫晓倩;汪秀会;刘晓敏;汪琪;单同领;李泽君;刘芹防;陈鸿军;滕巧泱;童光志;于海

作者机构：

关键词： HA1基因;禽源H1N1亚型猪流感病毒;原核表达;可溶性;抗原性

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2015 年 04 期

页码： 14-18

摘要： 本研究利用RT-PCR技术扩增禽源H1N1亚型猪流感病毒(Swine influenza virus,SIV)的HA1基因片段,将其连接至p Cold-TF载体上,菌液鉴定为阳性的克隆经测序验证正确后,提取质粒转化至高表达的表达宿主菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导并大量表达目的蛋白。表达产物经过纯化及SDS-PAGE电泳分析,表明重组蛋白以可溶性形式在上清中大量表达,大小约90 k Da,且在15℃、0.8 mmol/L IPTG条件下诱导24 h表达效果最好。通过Ni柱纯化后,经Western blot分析表明重组表达的蛋白能与禽源H1N1亚型SIV阳性血清发生特异性反应,具有较好的反应原性。

分类号： S852.651

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