大口黑鲈溃疡综合征病毒TaqMan-MGB探针荧光定量PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 马冬梅

作者： 马冬梅;白俊杰;邓国成;李胜杰;张莉莉

作者机构：

关键词： 大口黑鲈溃疡综合征病毒;TaqMan-MGB探针;定量PCR;病毒检测

期刊名称： 华南农业大学学报

ISSN： 1001-411X

年卷期： 2011 年 32 卷 02 期

页码： 105-108

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据大口黑鲈溃疡综合征病毒(Largemouth bass ulcerative syndrome virus,LBUSV)的甲基转移酶(MTase)基因核苷酸序列设计引物及TaqMan-MGB探针,优化荧光定量PCR反应条件和反应体系,建立了LBUSV的TaqMan-MGB探针荧光定量PCR检测方法.用含有MTase基因的质粒pDNA-MT系列稀释作为标准品模板,在荧光定量PCR仪上进行PCR反应,绘制标准曲线,斜率为-3.24,R2=0.999,呈现很好的线性关系,扩增效率1.04.灵敏度检测结果表明,PCR反应24个循环时可以检测到的质粒最小浓度是102拷贝数/μL.选用107、106、105、104拷贝数/μL 4个浓度梯度质粒做模板,变异系数在1.1%~3.4%范围内,说明该方法具有良好的重复性和稳定性.利用该方法可以准确地检测出感染LBUSV的病鱼,特异性强.

分类号： S943

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