小麦原生质体高效转化体系的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 刘鑫

作者： 刘鑫;魏学宁;张学文;张增艳

作者机构：

关键词： 小麦原生质体;核酸酶活性;原生质体转化效率;抗病相关基因;亚细胞定位

期刊名称： 植物遗传资源学报

ISSN： 1672-1810

年卷期： 2016 年 01 期

页码： 117-124

收录情况： CSCD

摘要： 植物原生质体广泛应用于植物基因功能研究中,包括瞬时基因表达、亚细胞定位、蛋白互作和蛋白活性分析等。当前,小麦基因的亚细胞定位和功能分析,大多利用模式植物拟南芥等异源的原生质体,易于造成研究结果的不准确。为避免这种情况,小麦原生质体制备及高效转化体系的建立与应用是必需的。在PEG介导的小麦原生质体转化过程中,原生质体分泌的核酸酶大量降解质粒DNA,转化效率的提高因此受到阻碍。为了建立小麦原生质体的高效转化体系,本文测试了抑制胞外核酸酶活性的因素和提高质粒DNA浓度等多个条件对转化效率的影响。结果表明,转化过程中加入双倍用量的质粒DNA进行转化,且始终保持低温环境(1℃)用以抑制核酸酶酶活性,可以使小麦原生质体的转化效率提高至85%。本文还将该系统成功地应用于2个小麦抗病相关蛋白的亚细胞定位研究,证明了该系统的高效性和实用性。该研究对未来相关研究有一定参考价值。

分类号： S512.1

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