大肠杆菌O157∶H7独有基因z3276的表达及初步鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张碧成

作者： 张碧成;张雪寒;何孔旺;范红结

作者机构：

关键词： 大肠杆菌O157∶H7;标签基因;z3276基因;原核表达

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2016 年 36 卷 08 期

页码： 1354-1357

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 经BLAST分析表明,开放阅读框z3276是大肠杆菌O157∶H7独有的遗传标志性基因,编码氨基酸与大肠杆菌Ⅰ型菌毛有较高的同源性,但z3276基因编码蛋白的生物学特性尚不明确。为了明确z3276基因编码蛋白的抗原性,进一步研究其在大肠杆菌O157∶H7致病过程中的作用。采用PCR方法扩增z3276基因,去除其信号肽序列,克隆到原核表达载体pColdⅠ,转化感受态细胞BL21获得阳性重组菌,IPTG诱导表达重组蛋白,以大肠杆菌O157∶H7全菌抗血清为一抗,Western blot方法检测重组z3276蛋白抗原性。结果显示,成功构建重组菌BL21(pColdⅠ-z3276),并获得高效表达;相对分子质量33 000,占菌体总蛋白30%以上,主要以包涵体形式存在于菌体沉淀中;且与兔源全菌多克隆抗血清发生特异性反应,条带明显。

分类号： R378

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