稳定表达山羊SLAM受体的BHK-21细胞系的建立及应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张家林

作者： 张家林;李翠翠;谢梅梅;王子龙;陈伟业;步志高

作者机构：

关键词： 信号淋巴细胞激活分子;BHK-21细胞;小反刍兽疫;犬瘟热;病毒分离

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2015 年 37 卷 07 期

页码： 506-509

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 信号淋巴激活分子(SLAM)又称为CD150,是小反刍兽疫病毒(PPRV)和犬瘟热病毒(CDV)等麻疹病毒属病毒感染淋巴细胞的主要受体,在病毒侵入细胞中发挥重要作用。为建立稳定表达山羊SLAM(g SLAM)的真核细胞系,本研究将人工合成的g SLAM基因克隆至真核表达质粒p IRESpuro3中,并在该基因的3'端引入Flag标签序列作为分子标记,构建了重组质粒p IRES3-g SLAM。将该重组质粒转染BHK-21细胞,经嘌呤霉素加压筛选及采用表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组PPRV病毒(r PPRV/GFP)感染鉴定后,筛选到稳定表达g SLAM基因的细胞系。r PPRV/GFP感染和western blot鉴定表明,无论是否有嘌呤霉素压力的存在,该细胞系在传代至第20代,仍能稳定表达g SLAM蛋白。由于g SLAM氨基酸序列与犬的同源性较高,以表达GFP重组CDV强毒株(r CDV/GFP)感染该细胞系,病毒可以感染且能形成明显的细胞病变,表明该细胞系可用于CDV强毒分离和致弱机制等相关研究。

分类号： S852.65

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