鸡白介素-2基因在大肠杆菌中表达及多克隆抗体制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 萨仁高娃

作者： 萨仁高娃;刘胜旺;孔宪刚;丁忠庆;乌尼

作者机构：

关键词： 鸡IL-2融合蛋白;表达;抗体制备

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1006-1304

年卷期： 2003 年 11 卷 04 期

页码： 412-416

收录情况： CSCD

摘要： 将编码鸡(Gallusgallus)白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)蛋白的基因亚克隆到大肠杆菌(Escherichiacoli)原核表达载体pPROEXTMHT中,构建重组质粒并进行确证性序列测定。然后将重组质粒转化大肠杆菌DH5α并用IPTG于37℃诱导培养。SDS-PAGE和Westernblot分析显示,表达的鸡IL-2融合蛋白分子量约为19kD。融合蛋白经薄层扫描发现目的蛋白表达量约占菌体蛋白的30%。包涵体被6mol/L盐酸胍裂解后,通过镍离子亲和树脂进行了纯化。用所获得的重组鸡IL-2融合蛋白及其纯化产物免疫家兔,制备兔抗鸡IL-2多克隆抗血清,并用琼脂扩散实验对多克隆抗血清进行鉴定,表明其与纯化的重组鸡IL-2蛋白具有良好的反应性,而且该反应是特异的。

分类号： Q786

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