PRRSV变异株ORF6基因与IL-18共表达真核质粒的构建及其表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王晓莉

作者： 王晓莉;李志杰;丁壮;张泉鹏;宣华;王贵平

作者机构：

关键词： PRRSV;真核质粒pEGFP-IL18-ORF6;表达

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2010 年 30 卷 10 期

页码： 1282-1285+1290

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 针对白细胞介素18(IL-18)基因和本实验室分离的PRRSVJL/07/SW毒株全基因序列,分别设计了2对特异性引物,扩增出IL-18基因和ORF6基因。将2个目的基因克隆于真核表达载体pEGFP-N1中,成功构建了重组真核质粒pEGFP-ORF6和pEGFP-IL18-ORF6,阳性质粒转染Marc-145细胞进行筛选。通过表达载体在转染细胞中的高效转染,增强型绿色荧光蛋白(EGFP)快速、准确的反映出阳性质粒在细胞质中的正确表达,再通过SDS-PAGE和Western blot鉴定构建的真核表达质粒pEGFP-IL18-ORF6的正确性。结果表明,ORF6基因和IL-18基因在Macr-145细胞中能有效表达。结论,所构建的真核质粒pEGFP-IL18-ORF6结构正确,能够在Marc-145细胞中高效表达,而且表达产物具有特异免疫学反应。

分类号： S852.5

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