猪乙脑病毒重组E基因的克隆表达及间接ELISA检测方法研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李海洋

作者： 李海洋;彭丽英;陶洁;殷秀辰;饶柏钟;刘惠莉

作者机构：

关键词： 乙脑病毒;E基因;重组E蛋白;间接ELISA

期刊名称： 上海农业学报

ISSN： 1000-3924

年卷期： 2015 年 03 期

页码： 1-5

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 参照已发表的猪乙脑病毒(JEV)基因组序列,设计引物,扩增出E基因,克隆到pMD19-T载体中。序列分析表明:E基因与NCBI登录的JEV毒株E基因序列同源性达到96.6%—99.7%;遗传进化分析表明:该JEV属于GIII病毒。将E基因片段亚克隆到pET32a-E,IPTG诱导表达E蛋白。Western Blot检测表明:该重组蛋白能与JEV高免血清发生非特异性反应,证明该表达产物为JEV E蛋白。以重组E蛋白为包被抗原,建立检测猪JEV抗体的间接ELISA方法,检测160份猪血清样品,与猪JEV抗体检测试剂盒进行平行性对比,结果显示二者的吻合率为92.2%,表明建立的ELISA方法具有较好的特异性,有望为临床提供一种JEV血清抗体检测方法。

分类号： R373

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