茎环RT-PCR检测马立克氏病毒感染鸡相关miRNA方法的建立

文献类型: 中文期刊

第一作者: 陈燕梅

作者: 陈燕梅;连玲;曲鲁江;刘长军;杨宁

作者机构:

关键词: 鸡;马立克氏病毒;miRNA;茎环RT-PCR

期刊名称: 中国家禽

ISSN: 1004-6364

年卷期: 2011 年 33 卷 09 期

页码: 9-13

收录情况: 北大核心

摘要: 本研究旨在建立一种检测马立克氏病毒人工感染鸡相关miRNA表达变化的RT-PCR方法,探讨该方法在miRNA定量检测方面的应用价值。试验选择6个具有典型肿瘤结节的马立克氏病毒感染脾脏样品作为研究材料,同时采用6个正常鸡的脾脏样品作为对照材料。利用特异的茎环反转录引物以及miRNA上下游引物对gga-miR-181a进行基于SYBR GreenⅠ的荧光定量PCR检测,并以U6为内参基因、2-ΔΔCt法检测gga-miR-181a的相对表达量。结果,在马立克氏病毒人工感染鸡的脾脏和正常鸡的脾脏中成功检测出gga-miR-181a-1的表达。证明茎环RT-PCR法能用于检测马立克氏病毒人工感染鸡的相关miRNA,并具有准确、快速、节约成本的优点。

分类号: S858.31

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