大口黑鲈GHRH基因启动子区域序列分析及其活性检测

文献类型: 中文期刊

第一作者: 马冬梅

作者: 马冬梅;韩林强;白俊杰

作者机构:

关键词: 生长激素释放激素;启动子活性;大口黑鲈

期刊名称: 海洋渔业

ISSN: 1004-2490

年卷期: 2016 年 38 卷 04 期

页码: 383-390

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 生长激素释放激素(growth hormone releasing hormone,GHRH)是下丘脑弓状核合成和分泌的小分子多肽,其主要功能是调节垂体细胞合成和释放生长激素。为研究大口黑鲈(Micropterus salmoides)GHRH基因5’侧翼启动子区域的活性和该区域中潜在的转录因子对GHRH基因表达的调控作用,对该基因5’端启动子区域约1400 bp长度的片段进行序列分析,预测顺式作用元件,获得了Oct-1、SP1、NF-1、C/EBPalp和C/EBP等多个潜在的调控GHRH基因表达的调节因子结合位点序列。在包括外显子1和内含子1的GHRH基因5’侧翼区两侧加入两个限制性酶切位点Xho I和Bam H I,对其进行改造,并将该片段插入红色荧光蛋白报告基因载体p DsRed2-1,构建了重组表达质粒pGHRH1-RFP。同时,用不含有外显子1和内含子1的GHRH基因5’侧翼区构建重组表达质粒p GHRH-RFP。将质粒pGHRH1-RFP和p GHRH-RFP转染鲤(Cyprinus carpio)上皮细胞(epithelioma papillosum cyprinid,EPC)。经过48 h的培养,在pGHRH1-RFP转染的部分细胞中检测到红色荧光蛋白表达。又将pGHRH1-RFP或p GHRH-RFP质粒注射到斑马鱼(Danio rerio)一细胞或二细胞期的胚胎中,注射了pGHRH1-RFP的胚胎在受精后48 h约有22.5%能检测到有红色荧光蛋白表达,受精后72 h约有29%的仔鱼检测到红色荧光蛋白表达。实验结果表明,目前分离到的GHRH基因5’侧翼序列具有启动基因表达的活性,且该基因的内含子1和外显子1是启动子的活性所必需的。另外,pGHRH1-RFP质粒注射的斑马鱼胚胎只能在胚胎和仔鱼的脊椎和肌肉中检测到RFP的表达,而在脑中没有检测到表达。推测扩增到的大口黑鲈GHRH启动子序列1407 bp(-1043 bp~362 bp)只是起到了驱动RFP脊椎和骨骼肌表达的作用,而不包括驱动在脑组织中特异性表达的启动子,本研究为GHRH基因功能的深入分析奠定了基础。

分类号: S917.4

  • 相关文献

[1]pGRF基因质粒对猪胴体性状和肌肉品质的影响. 姚立楷,张宏福,卢庆萍,萨仁娜,刘福柱,卫星辉,丁国庆. 2010

[2]质粒纯化及动物骨骼肌电穿孔转基因的研究. 皮文辉,巩霞,孟庆勇,宋志强,姬勇,刘守仁. 2008

[3]外源GHRH基因质粒对犊牛免疫功能的影响. 王杨,黄会岭,孙宝忠,刘艳军,孟庆勇. 2007

[4]鹅p21基因克隆、启动子分析及转录调控研究. 陈哲,杨鹏霞,雷明明,陈佳彬,闫乐艳. 2022

[5]GDF9基因g.46547645T>G位点对启动子活性和蒙古羊产羔数的影响. 程子轩,路大同,刘佳森,李蕴华,张秀英,朝鲁蒙,仓明,王建国,于海泉,李光鹏,佟彬. 2021

[6]角蛋白启动子荧光素酶表达载体的构建及其表达活性分析. 代蓉,孟庆勇,沈思军,石国庆,刘守仁. 2011

[7]激素和非生物胁迫对月季RhPIP1;1启动子活性的调节作用. 阴霞,陈雯,王磊,杨若韵,薛璟祺,高俊平. 2014

[8]一种基于NanoLuc荧光素酶报告布鲁菌基因启动子活性质粒的构建及应用. 连拯民,田明星,尹伊,石文弢,包世俊,于圣青. 2020

[9]转录因子Sp1对成肌细胞中猪SKIP的表达调控作用. 熊琪,柴进,张年,索效军,李晓锋,杨前平,刘洋,陈明新. 2012

[10]香蕉束顶病毒DNA组分2、3的启动子区的组织特异性分析. 庄军,刘志昕. 2007

[11]烟草CYP82E4基因启动子功能分析. 望锦,张幸子,王雅琦,宋时洋,李凤霞. 2024

[12]绵羊高硫角蛋白KAP1.3基因启动子活性分析. 朱汇,张红琳,代蓉,万鹏程,郭洪,石国庆. 2012

[13]绵羊D1x3基因启动子活性及其多态性与羊毛品质性状的关联. 裴文宇,云杰,荣恩光,杨华,王志鹏,王守志,李辉,王宁. 2013

[14]PpMYB10.1启动子483 bp缺失与红肉桃果肉颜色形成关系的研究. 王蛟,曹珂,王玲玲,王力荣. 2023

[15]草鱼MyD88基因组结构解析及启动子活性探讨. 陈晓慧,毋凯凯,杨春荣,付小哲,吴淑勤,苏建国. 2015

[16]棉花中GhTFL1a和GhTFL1c基因的表达及启动子分析. 张晓红,胡根海,王寒涛,王聪聪,魏恒玲,付远志,喻树迅. 2019

[17]鹅MyoG基因启动子活性及转录调控元件分析. 陈哲,陈蓉,闫乐艳,陈佳彬,于建宁. 2021

[18]马传染性贫血病毒LTR在驴胎皮肤细胞中的基因进化及启动子活性比较. 全滟平,沈楠,郭巍,赵立平,周建华,沈荣显,相文华. 2008

[19]绵羊Dlx3基因启动子活性及其多态性与羊毛品质性状的关联. 裴文宇,云杰,荣恩光,杨华,王志鹏. 2013

[20]琥珀蚕孵化酶基因AaHE的克隆及启动子活性分析. 陈安利,董占鹏,唐顺明,刘增虎,李涛,廖鹏飞,李琼艳. 2021

作者其他论文 更多>>