肌肉生成抑制素基因敲除猪多重PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李晓琳

作者： 李晓琳;王勤;朱振营;吴绍强;仇松寅;刘晓飞;孙敏;潘登科;林祥梅

作者机构：

关键词： 转基因检测;多重PCR;MSTN基因敲除猪

期刊名称： 南京农业大学学报

ISSN： 1000-2030

年卷期： 2015 年 38 卷 06 期

页码： 993-997

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： [目的]本试验旨在建立肌肉生成抑制素基因(myostatin,MSTN)敲除猪的快速检测方法,为该品系转基因猪及其产品的检测提供技术支持。[方法]根据猪β2-微球蛋白基因(β2-microglobulin,B2M)设计猪内源性基因引物,标记基因新霉素磷酸转移酶基因(neomycin phosphotransferaseⅡ,NPTⅡ)和测定的边界序列设计特异性引物,对引物的量进行调整,优化反应条件。对PCR的敏感性和特异性进行检测,并应用建立的方法对随机选取的32份猪肺和脾脏组织样品进行检测,均仅扩增出B2M条带。[结果]该方法的最佳退火温度为56℃,最低能检测出含1%MSTN基因敲除基因组成分的样本,对32份组织样本仅扩增出B2M条带。[结论]建立的多重PCR方法敏感、特异,在一个反应中能检测多个基因片段,可用于MSTN基因敲除猪的检测,为此品系转基因动物检测标准的建立提供依据。

分类号： Q78

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