基于天然poIFN-α17突变的高活性猪干扰素α17m的制备及其体外抗病毒活性

文献类型： 中文期刊

第一作者： 方剑玉

作者： 方剑玉;游一;席燕燕;张青娴;毛展展;徐彬;郎丽敏;陈红英;李绍钰

作者机构：

关键词： 猪干扰素α17m;大肠杆菌表达;干扰素刺激基因;抗病毒

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2024 年 005 期

页码： 921-927

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为获得高抗病毒活性的猪α亚型干扰素（porcine interferon α,poIFN-α）,将天然的poIFN-α17进行突变和合成，并将突变后的猪poIFN-α17基因命名为poIFN-α17m,合成poIFN-α17和poIFN-α17m基因后将其克隆入pVB220大肠杆菌表达载体，将该载体转化DH5α感受态细胞，进行温度诱导表达后，收集菌体进行SDS-PAGE。将表达的蛋白采用Ni琼脂糖凝胶纯化后，采用Western blot检测重组poIFN-α17和poIFN-α17m的反应原性，在PK-15细胞上检测其对VSV和PRV的抗病毒活性，检测重组poIFN-α17和poIFN-α17m蛋白对下游干扰素刺激基因（interferon stimulating genes, ISGs）Mx1、OAS1、ISG15的诱导激活作用。结果显示，成功构建了pVB220-IFN-α17和pVB220-IFN-α17m表达载体，实现了poIFN-α17和poIFN-α17m在大肠杆菌中的表达。该蛋白具有良好的反应原性，且重组poIFN-α17m在PK-15细胞上对水泡性口炎病毒（vesicular stomatitis virus, VSV）和猪伪狂犬病病毒（pseudorabies virus, PRV）的抗病毒活性明显高于天然的poIFN-α17,重组poIFN-α17m能有效激活ISGs的表达。

分类号： S859.797

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