小麦白粉病菌基因组DNA的微量提取及ISSR-PCR反应体系的优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 朱海荣

作者： 段霞瑜;周益林;邱永春

作者机构：

关键词： 小麦白粉病菌;DNA微量提取;ISSR-PCR;体系优化

期刊名称： 植物保护

ISSN： 0529-1542

年卷期： 2010 年 36 卷 03 期

页码： 125-129

收录情况： 北大核心

摘要： 为了寻找适合小麦白粉菌基因组DNA微量提取的方法,本试验利用改进的CTAB法、电钻微量研磨一管法、FastPrep DNA试剂盒法和Chelex-100法分别提取小麦白粉菌基因组DNA。比较得出,在微量提取时,CTAB法的提取率较高;在分生孢子量较多时,FastPrep DNA试剂盒方法提取的DNA质量较高,这两种方法提取的DNA均适用于ISSR-PCR。采用正交设计L16(45)法优化了适合于小麦白粉病菌群体的ISSR体系,确定了25μL时优化的反应体系:1×buffer、模板DNA0.5ng、dNTP0.14mmol/L、TaqDNA聚合酶1U、引物1.4μmol/L、Mg2+1.8mmol/L。利用该体系筛选出了一批多态性较好的ISSR引物,为小麦白粉病菌遗传多样性研究奠定了基础。

分类号： S435.121.146

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