布鲁氏菌免疫磁珠qPCR检测方法的建立及应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 孙晶晶

作者： 孙晶晶;曹小安;吴锦艳;尹双辉;周建华;兰喜;李学瑞;刘永生;尚佑军

作者机构：

关键词： 布鲁氏菌;免疫磁珠;qPCR方法;敏感性

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2020 年 010 期

页码： 1243-1248

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立高效、快速和准确检测布鲁氏菌病原的免疫磁珠qPCR方法,本研究根据GenBank已经发表的布鲁氏菌流产株BRS 19 ku外膜蛋白(Omp19)基因组序列来设计qPCR方法所需要的引物和探针,利用免疫磁珠富集浓缩样品中少量的布鲁氏菌病原,建立了布鲁氏菌免疫磁珠qPCR检测方法.采用qPCR方法对免疫磁珠分离的布鲁氏菌的敏感性、特异性、稳定性及临床应用进行了研究.结果显示,免疫磁珠qPCR方法检测布鲁氏菌的最低检测限为1*10~3CFU/mL.该方法可以扩增不同种型布鲁氏菌,对其他细菌没有发生交叉反应.该方法的批内和批间的变异系数均低于10%,具有较高稳定性.免疫磁珠qPCR方法与常规qPCR的符合率为94.74%,具有良好的吻合性.上述结果表明,本研究建立的免疫磁珠qPCR方法检测布鲁氏菌具有较高的敏感性、特异性和稳定性,为布鲁氏菌病的准确诊断检测和流行病学调查提供技术支撑.

分类号： S852.61

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