两株CRISPR工程大肠埃希菌在小鼠体内的定植实验研究

文献类型： 中文期刊

第一作者： 任晨吟

作者： 任晨吟;高思琦;李浩;唐标;杨华;刘月环

作者机构：

关键词： CRISPR工程大肠埃希菌;肠道定植能力;定植效率;ICR小鼠

期刊名称： 实验动物与比较医学

ISSN： 1674-5817

年卷期： 2022 年 006 期

页码： 541-550

摘要： 目的 利用小鼠对2株大肠埃希菌工程菌Nissle1917和BW25113在肠道的定植能力与定植效率进行评价，以筛选出肠道定植效率高的菌株，为后续利用成簇的规律性间隔的短回文重复序列（clustered regularly interspersed short palindromic repeats,CRISPR）及其相关蛋白（CRISPR associated protein,Cas）系统的工程菌消减体内耐药菌的研究奠定基础。方法 每株工程菌的实验共取70只18～20 g的ICR小鼠，雌雄各半，操作时小鼠区分性别并随机分为7个处理组，每组10只（6只实验，4只对照）。实验组灌胃2×1010个工程菌共200μL，对照组灌胃等体积的PBS。灌胃后1、3、6、12、24、48、72 h分别取小鼠的肠系膜淋巴结、胃、回盲部、结肠组织及内容物，分别采用平板划线、荧光镜检和PCR法检测工程菌，比较Nissle1917和BW25113这2菌株在小鼠体内的定植能力与效率。结果 灌胃后前6个时段（1、3、6、12、24、48 h）中，3种方法检测到2株菌在胃、回盲部、结肠组织有定植，淋巴结未检到目标菌株；而72 h有且仅有Nissle1917菌定植于回盲部和结肠组织，Nissle1917和BW25113两株菌的定植效率分别为100%和0。结论 Nissle1917菌定植效率高于BW25113菌，且能较长时间定植于回盲部和结肠组织，提示其可作为防控耐药基因传播用CRISPR系统的备选载体菌。

分类号： R-332

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