大鼠疑似泰勒氏病毒荧光定量检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 蔡骁垚

作者： 蔡骁垚;魏晓锋;熊炜;陈懿斐;林颖峥;张泉;陈鸿军

作者机构：

关键词： 大鼠;疑似泰勒氏病毒;TaqMan;荧光定量PCR

期刊名称： 中国实验动物学报

ISSN： 1005-4847

年卷期： 2017 年 04 期

页码： 433-437

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的建立一种能在临床上快速、准确地检测大鼠疑似泰勒氏病毒(Theiler’s-like virus of rats,TLV)的方法,采用TaqMan探针荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)技术,特异性针对TLV病毒核酸进行检测。方法通过基因合成序列作为质粒标准品的模板,同时选择特异性的序列在3622~3729 nt处,设计一对引物和TaqMan性探针,优化反应体系及条件,进行qPCR扩增,从而建立TLV TaqMan探针qPCR方法,并对其灵敏度、稳定性和特异性进行评价。结果建立的TLV qPCR检测方法,标准曲线线性关系良好,R~2值可达到0.99,灵敏性最低能够检测到10个拷贝数/μL,对比普通PCR方法,高出其100倍;对其他常见大鼠病毒均无非特异反应;重复性良好,批内和批间变异系数均小于1%。结论利用TaqMan探针建立快速检测TLV的荧光定量PCR方法,该方法具有操作简便、灵敏度高、特异性好等特点。

分类号： Q95-33

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