雷蒙德氏棉叶绿体基因组Fosmid文库构建

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李朋波

作者： 李朋波;薛龙飞;王彦霞;张曦;李召虎;华金平

作者机构：

关键词： 雷蒙德氏棉;叶绿体DNA;Fosmid文库

期刊名称： 棉花学报

ISSN： 1002-7807

年卷期： 2011 年 23 卷 01 期

页码： 10-14

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用高盐、低pH值法提取雷蒙德氏棉叶绿体DNA;通过物理剪切法获得随机断裂的DNA片段;剪切片段末端、补平修饰后与pCC1FOS载体连接;用噬菌体包装蛋白包装重组DNA,侵染大肠杆菌EPI300,构建了雷蒙德氏棉叶绿体基因组文库。对于叶绿体DNA剪切,以1 mL注射器中等速度吸打18次为最佳参数。叶绿体基因组Fosmid文库滴度为1×104 cfu.mL-1,插入片段大小平均为38 kb,最终筛选出39个克隆用于后续研究,覆盖叶绿体基因组9.2倍。以叶绿体特异标记筛选出能够覆盖雷蒙德氏棉叶绿体全基因组的6个克隆:F66,F46,F28,F8,F55和F3,为基因组结构和功能基因分析提供了良好的基础。

分类号： S562

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