中蜂囊状幼虫病毒RT-PCR检测方法的建立与应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张明华

作者： 张明华;韦小平;周碧君;文明;程振涛;田琴;王开功

作者机构：

关键词： 中蜂囊状幼虫病毒;RT-PCR;VP3基因;中华蜜蜂

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2021 年 003 期

页码： 275-280

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立中蜂囊状幼虫病毒（CSBV）核酸的特异性检测方法,以CSBV结构蛋白VP3基因为靶基因,根据GenBank中序列合成1对特异性引物,建立了CSBV RT-PCR检测方法。以CSBV克隆质粒作为模板和蜜蜂6种不同病毒,分别进行特异性、敏感性、重复性试验。结果显示:所建立的RT-PCR检测方法能扩增出CSBV特异性片段,且不能扩增出蜜蜂以色列急性麻痹病毒、蜜蜂畸翅病毒、蜜蜂急性麻痹病毒、蜜蜂慢性麻痹病毒、黑蜂王台病毒、蜜蜂克什米尔病毒;CSBV阳性质粒最低检测质量浓度为2.82 fg/m L;对CSBV阳性质粒和双蒸水空白对照组重复检测3次,均能扩增出与预期一致的特异性片段。利用该检测方法对从贵州省不同养蜂场采集的100份中华蜜蜂样本进行检测,71份样本为阳性,通过序列比对分析,同源性高达99.16%,进一步证实为CSBV。结果表明,所建立的CSBV检测方法特异性强、敏感性高、重复性好,具有良好的实用性。

分类号： S895.133

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