稳定表达跨膜丝氨酸蛋白酶2基因的MDCK细胞系的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 吕让

作者： 吕让;王丹;宋彩玲;齐宾宾;刘明

作者机构：

关键词： 跨膜丝氨酸蛋白酶2;逆转录病毒;MDCK细胞系

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2014 年 36 卷 09 期

页码： 704-707

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立稳定表达跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)基因的MDCK细胞系,本研究采用RT-PCR扩增TMPRSS2基因,克隆于逆转录病毒载体pLXSN中,构建重组质粒pLXSN-TMPRSS2。采用脂质体转染的方式将重组质粒pLXSN-TMPRSS2、pGP和pE-ampho共转染293T细胞,获得逆转录病毒样颗粒。将逆转录病毒样颗粒感染MDCK细胞,经G418加压筛选和有限稀释法克隆及RT-PCR和间接免疫荧光(IFA)等试验的鉴定,建立了稳定表达TMPRSS2基因的MDCK细胞系。此外,红细胞凝集试验和IFA结果还显示,流感病毒可以在无外源胰酶存在的条件下在该细胞系中增殖,从而为流感细胞培养型病毒株的大规模生产奠定了基础。

分类号： S852.65

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