日本血吸虫卵壳蛋白前体基因Sj423的克隆表达及分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 金亚美

作者： 金亚美;程国锋;刘金明;傅志强;石耀军;林矫矫;蔡幼民

作者机构：

关键词： 日本血吸虫;卵壳前体蛋白;基因克隆;基因表达

期刊名称： 中国人兽共患病学报

ISSN： 1002-2694

年卷期： 2009 年 25 卷 12 期

页码： 1154-1157

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 据日本血吸虫菲律宾株编码卵壳前体蛋白的一段230bp的序列设计PCR引物,以日本血吸虫中国大陆株成虫mRNA为模板,用RT-PCR方法扩增出日本血吸虫中国大陆株相应的基因片段、然后根据测序结果设计一系列引物,用5’RACE和3’RACE法扩增出该基因cDNA的5’和3’端,再根据测序结果设计全长引物,用RT-PCR方法扩增出大小为423bp的片段。经序列分析推断该基因片段为编码日本血吸虫中国大陆株卵壳前体蛋白基因的完整阅读框,对相应基因组区段测序证实该基因没有内含子(GenBank登录号:AF519182)。将其克隆到表达载体pET28c(+)中,在大肠杆菌中获得表达,融合表达产物分子量约为20.9 kD。Real-ti me PCR结果显示该蛋白在尾蚴感染宿主后第23d即卵壳形成时高表达。利用日本血吸虫成虫抗原免疫血清对该表达产物进行Western印迹检测,在预测位置出现了明显的识别条带,说明该编码日本血吸虫中国大陆株抱雌沟蛋白基因的表达产物具有抗原性。

分类号： R383.2

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