对虾肝胰腺坏死病副溶血弧菌双重微流控荧光定量PCR快速检测技术的建立与应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李昊

作者： 李昊;张铭洋;于永翔;王印庚;张正;马翠萍;陈夫山

作者机构：

关键词： 急性肝胰腺坏死病;副溶血弧菌;pirA;pirB;微流控芯片;现场检测

期刊名称： 渔业科学进展

ISSN： 2095-9869

年卷期： 2023 年 003 期

页码： 235-244

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 急性肝胰腺坏死病（AHPND）是对虾养殖过程中最常见、最严重的疾病，给对虾养殖造成重大经济损失。AHPND病原种类多、基因型复杂，现有的针对不同病原的检测技术目标导向较弱、检测成本高、时间消耗长，对虾健康养殖亟待开发AHPND的精准快速诊断技术。本研究针对AHPND病原体携带编码一种二元毒素pirA和pirB大型质粒的遗传共性，基于pirA和pirB基因设计特异性引物并建立微流控荧光定量PCR检测方法。该方法对致病基因pirA和pirB特异性强、灵敏度高，最低检测限分别为5.43×10~0和4.31×10~1 copies/μL，样品平均检测时间为26min左右。为进一步评估该方法在实际应用中的准确性，以含有pirA和pirB毒性质粒的副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）进行人工感染实验。结果表明，感染后的凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）鳃丝、肝胰腺、肠道和肌肉等组织随时间的推迟均能检测到pirA和pirB；从感染2h的结果来看，pirB比pirA检出率更高。此外，致病因子pirA和pirB比toxR的检出率更高，更适合对AHPND致病原的检测。本研究建立的微流控荧光定量PCR检测的方法具有快速、灵敏、高通量、污染少、现场检测、一体化集成等优点。该技术不仅适用于实验室，更符合养殖基层的现场快速检测需求，为及早认知疾病发生风险和病害精准防控提供了新的技术手段与理论支撑。

分类号： S945.4

  • 相关文献

[1]副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)中溶源噬菌体与其宿主菌致病力的相关性. 王娜,王海亮,白楠,黄倢,谢达祥,谢起浪,於俊琦,万夕和. 2016

[2]凡纳滨对虾急性肝胰腺坏死病(AHPND)病原分离鉴定及其致病性分析. 贾丹,史成银,黄倢,张庆利,万晓媛,许华,刘冉阳,王海波,郭程程,谢国驷. 2018

[3]中国明对虾急性肝胰腺坏死病(AHPND)和池塘水体中弧菌的检测分析. 陈晓玲,邱亮,魏海英,王君霞,孙成峰,许传堂. 2020

[4]基于Deep Forest算法的对虾急性肝胰腺坏死病(AHPND)预警数学模型构建. 王印庚,于永翔,蔡欣欣,张正,王春元,廖梅杰,朱洪洋,李昊. 2024

[5]卵黄抗体对凡纳滨对虾生长、免疫及抗VpAHPND感染的影响. 王仁宝,史成银,宋晓玲,王一婷,张惠芬,任宁欣,谢国驷,张庆利. 2022

[6]基因组DNA快速提取及在转基因大豆检测中的应用. 陈欲,汪小福,陈笑芸,彭城,徐俊锋,李玥莹. 2021

[7]常见犊牛腹泻病原的检测要点和防控措施. 于化福,靳文仲,刘景喜,芦娜,陈龙宾. 2020

[8]便携式生物传感器在真菌毒素检测中的应用研究进展. 王沂雯,刘晏霖,付瑞杰,刘浩然,周静,赵其阳,王成秋,焦必宁,何悦. 2022

[9]快速提取肉类基因组DNA的裂解液的研究. 李婷婷,张桂兰,王之莹,陈爱亮. 2018

[10]基于胶体金免疫层析技术的"瘦肉精"三联检测卡研制. 李鹏,李嘉豪,张春洋,宋书意,曹又文,王米拉,温墩,储蕊,单衍可,刘斐. 2025

[11]光谱技术在蔬菜生产检测中的研究进展、挑战与建议. 白珏坤,陈怀勐,董大明,刘亚超,岳晓龙,杜秀可. 2025

[12]基于重组酶聚合酶扩增的转基因玉米和大豆现场快速检测方法. 闫家通,陈冠玮,缪青梅,彭城,杨蕾,陈笑芸,徐晓丽,魏巍,徐俊锋,汪小福. 2025

[13]单细胞技术进展及其在植物研究中的应用. 孙蒙祥. 2016

[14]微流控法低温保护剂添加及去除线型优化研究. 周新丽,杜羽琨,衣星越,戴建军,张德福. 2019

[15]鉴别牛5种重要病毒的LAMP-基因芯片方法的建立. 高峰,华利忠,于伯华,王建峰,张丹,张琳,唐泰山,张常印. 2019

[16]微流控芯片用于卵母细胞冷冻保存的实验研究. 周新丽,郭莹莹,衣星越,戴建军,张德福. 2018

[17]微流控芯片恒温扩增技术快速检测米饭中的蜡样芽孢杆菌. 王珍,贺磊,肖英平,卢先东,刘艳红,陆雯,王首锋. 2021

[18]微流控芯片加载低温保护剂过程中卵母细胞的损伤评估. 邵文琪,郭莹莹,戴建军,张德福,周新丽. 2019

[19]基于DNA四面体的微流控芯片用于致病性大肠杆菌O157∶H7的检测. 朱福琳,卞晓军,田润,李亮,颜娟,刘刚. 2020

[20]微流控芯片技术研究概况及其应用进展. 曾洪梅,张桦,邱德文. 2014

作者其他论文 更多>>

微信小程序