猪可溶性CD40L三聚体蛋白的原核表达及其对口蹄疫病毒样颗粒疫苗免疫效果评价

文献类型： 中文期刊

第一作者： 贺艳艳

作者： 贺艳艳;陈凌波;魏甜;滕志东;张韵;张铭洋;马文倩;敬晓棋;郭慧琛;穆素雨;孙世琪

作者机构：

关键词： 5B CD40L;口蹄疫;免疫效果

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2025 年 56 卷 010 期

页码： 5072-5083

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 旨在评价猪可溶性CD40L三聚体蛋白对口蹄疫(foot-and-mouth disease,FMD)病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)疫苗的免疫增强效果.本研究将含猪CD40配体(CD40L)三聚体(5B CD40L)基因的质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,纯化的重组5B CD40L蛋白偶联FITC后与PBMCs进行反应,使用荧光显微镜研究CD40L蛋白与单核细胞反应的生物活性.进一步将5B CD40L、VLPs和5B CD40L-VLPs免疫豚鼠,通过检测中和抗体、脾淋巴细胞增殖以及实时RT-qPCR评估5B CD40L对VLPs疫苗免疫效果的影响.SDS-PAGE和West-ern blot结果显示,表达的重组5B CD40L蛋白大小约32 ku,确定最佳表达条件为16 ℃、OD600nm值为0.9、0.5 mmol L-1浓度IPTG诱导12 h;流式细胞仪分析表明,重组CD40L蛋白能与猪外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)表面的CD40蛋白分子结合.5B CD40L联合VLPs可以加速特异性抗体及中和抗体反应,提高脾淋巴细胞增殖水平,并且在5B CD40L-VLPs组中,脾脏细胞的IL-2和INF-γ mRNA显著高于VLPs组.综上所述,5B CD40L具有增强FMD VLPs疫苗体液免疫应答和细胞免疫应答的能力,具有作为疫苗佐剂的潜力.

分类号： S855

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