重组人早孕因子的表达与纯化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 杜晓明

作者： 杜晓明;张改平;王丽;郭军庆;王林林;冯华;权凯;王爱萍

作者机构：

关键词： 早孕因子;原核表达;重组蛋白

期刊名称： 中国农学通报

ISSN： 1000-6850

年卷期： 2011 年 27 卷 14 期

页码： 40-44

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 早孕因子(EPF)是具有免疫抑制和生长调节活性的妊娠相关蛋白,为目前最早确认妊娠的生化指标之一。为获得人早孕因子重组蛋白,通过PCR技术扩增人早孕因子基因,克隆入原核表达载体pGEX-6p-1,与GST基因相融合,构建重组表达质粒,转化大肠杆菌表达菌株BL21,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,以SDS-PAGE和Western blot分析重组蛋白的表达,通过GST树脂纯化表达蛋白。结果成功构建重组表达质粒pGEX6P-EPF,在大肠杆菌中诱导表达了GST-EPF融合蛋白,表达蛋白分子量为37.3kDa,并能被抗GST单克隆抗体特异识别,GST亲和层析纯化,制备了EPF重组蛋白。

分类号： Q78

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