胎儿弯杆菌病TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

第一作者: 赵海玲

作者: 赵海玲;刘慧芳;杜艳芬;司微;王春来;刘思国

作者机构:

关键词: C.fetus;表面蛋白基因SapA;实时荧光PCR;TaqMan水解探针

期刊名称: 中国预防兽医学报

ISSN: 1008-0589

年卷期: 2009 年 31 卷 11 期

页码: 874-877

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为建立胎儿弯杆菌(C.fetus)定量检测方法,本研究根据C.fetus毒力因子表面蛋白(SapA)的基因序列设计引物和一条特异的TaqMan水解探针,建立了一种敏感、特异、重复性好的快速检测C.fetus的TaqMan荧光定量PCR方法。对该方法的特异性与敏感性研究,结果显示,该方法检测C.fetus结果均为阳性,而非C.fetus均为阴性;对带有SapA基因的阳性质粒的检测敏感性为108拷贝~102拷贝/μL范围内具有良好的线性关系,可敏感地检测到模板中13个拷贝的细菌DNA,其灵敏度是常规PCR方法的100倍。该方法具有简便、快速、特异性强、敏感性高等特点。该方法为C.fetus快速检测试剂盒的研制打下了良好的基础。

分类号: R450

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