枯草芽孢杆菌NCD-2菌株的高效电击转化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王培培

作者： 王培培;郭庆港;李社增;鹿秀云;李宝庆

作者机构：

关键词： 枯草芽孢杆菌;电击转化;转化效率

期刊名称： 中国生物防治学报

ISSN： 2095-039X

年卷期： 2011 年 27 卷 03 期

页码： 368-372

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究对影响枯草芽孢杆菌Bacillus subtilisNCD-2菌株遗传转化的因素进行摸索并对其转化条件进行优化,建立了该菌株的高效电击转化体系。通过比较5个不同大小和携带不同来源复制子的质粒对其转化效率的影响,发现质粒大小与NCD-2菌株的电击转化效率之间没有相关性;而携带来源于Bacillus coagu-lans复制子的质粒pNW33N时,NCD-2菌株的电击转化效率最高,达到3.53×104cfu.μg-1DNA,说明复制子来源是影响转化效率的一个重要因素。采用pNW33N质粒在不同电阻、电场强度及培养时间下的电击转化效率的研究结果表明,该菌株转接到生长培养基后,37℃、150r.min-1培养3.5h,在电阻值200Ω、电场强度14.0kV.cm-1的条件下转化效率最高,达到6.07×104cfu.μg-1DNA。优化后的转化体系为顺利开展枯草芽孢杆菌NCD-2菌株的分子操作奠定了基础。

分类号： S476.8

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