一种新型果胶裂解酶基因在大肠杆菌中的表达及序列分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 徐欢

作者： 徐欢;冯湘沅;郑科;杨琦;段盛文;成莉凤

作者机构：

关键词： 苎麻;果胶裂解酶;生物脱胶;原核表达;生物信息学

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2023 年 001 期

页码： 196-201

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了获得高酶活力的苎麻脱胶果胶裂解酶，为后续分子改造和新型苎麻生物脱胶酶制剂复配提供理论依据。将果胶裂解酶基因pel419从重组质粒pEASY-Blunt E1-pel419更换至pET28a载体中，转化大肠杆菌BL21（DE3）诱导表达；用SDS-PAGE和Western Blot检验pel419基因的表达效果；用生物信息学软件分析Pel419理化表征和系统发育，预测其二级结构、高级结构及关键氨基酸位点。结果表明，工程菌pET28a-pel419/BL21的果胶裂解酶活力为434.4 U/mL,较pEASY-Blunt E1-pel419/BL21提高了1.7倍；Pel419含375个氨基酸，N末端前22个氨基酸为信号肽，理论pI值为6.59,有4个半胱氨酸，不稳定系数为18.20;其蛋白结构域含有典型的右手β-螺旋结构，属于Pec lyase C家族；Pel419的Ca2+结合位点为ASP151、ASP153和ASP192,定位发现3个保守位点均暴露在三维空间的表面，并处于底物结合空间口袋。大幅度提高了Pel419表达量，并获得了Pel419关键结构信息。

分类号： TS123.2%Q78

  • 相关文献

[1]苎麻脱胶果胶裂解酶基因的高效表达及序列分析. 徐欢,段盛文,冯湘沅,郑科,杨琦,汪启明,成莉凤,彭源德. 2021

[2]苎麻生物脱胶技术应用研究. 刘正初,罗才安,杨瑞林,孙庆祥,彭源德. 1991

[3]苎麻生物脱胶工艺技术与设备生产应用研究. 刘正初,彭源德,冯湘沅,杨喜爱. 2000

[4]黑曲霉果胶裂解酶基因的克隆与原核表达. 谢茂芳,薛保国,吴坤. 2013

[5]一种果胶裂解酶基因(pel)表达体系构建及其表达产物的酶学性质. 成莉凤,刘正初,段盛文,冯湘沅,郑科,郑霞,程毅. 2013

[6]果胶裂解酶基因的克隆与原核表达. 宋立立,顿宝庆,奚亚军,彭源德,白娜. 2010

[7]羊草几丁质酶ClassⅡ基因的克隆、生物信息学分析及原核表达. 李蕊沁,冯树丹,于莹,吕召志,黎莉,徐明华,尹悦佳,郝东云. 2010

[8]中华蜜蜂GABARAP基因克隆、生物信息学分析及原核表达载体的构建. 于慧敏,吴鹏杰,李南南,谭静,徐书法,武江利. 2022

[9]猪链球菌4型GalR蛋白的生物信息学分析及原核表达. 孙珂,祝昊丹,周俊明,王丹丹,俞正玉,吕立新,何孔旺,李彬,倪艳秀. 2021

[10]玉木耳漆酶基因Aclac的克隆及原核表达. 苏文英,谭一罗,刘晓梅,杨和川,秦裕营,李晓,任立凯. 2021

[11]犬冠状病毒BC-1株核衣壳蛋白的原核表达及生物信息学分析. 王静,梁琳,罗亚坤,袁维峰,崔尚金. 2018

[12]猫传染性腹膜炎病毒AH1905株N基因的生物信息学分析及原核表达. 王元红,邢雪,李传峰,朱杰,王勇,刘光清. 2020

[13]非洲猪瘟病毒解旋酶Q706L基因的生物信息学分析及原核表达. 王国超,张忠辉,白鸽,赵亚茹,吴奇强,王一望,孙华林,杨吉飞,关贵全,殷宏,罗建勋,牛庆丽. 2022

[14]堆型艾美耳球虫ATP酶基因的生物信息学分析及原核表达. 阎晓菲,孔苗,韩红玉,董辉,黄兵. 2019

[15]环形泰勒虫表面抗原重组蛋白Tasp-Tams1-Spag1生物信息学分析与原核表达. 任方,易忠,米晓云,魏婕,马文戈,郭会玲,苗书魁,汪立群,王延. 2015

[16]环形泰勒虫表面抗原Tasp-Spag1基因串联表达及其蛋白生物信息学分析. 任方,易忠,米晓云,魏婕,马文戈,郭会玲,苗书魁,汪立群,王延. 2015

[17]花生NBS-LRR类抗病基因的克隆及原核表达. 刘宇,闫彩霞,张延婷,李春娟,郑奕雄,单世华. 2010

[18]香蕉MaASR1基因的生物信息学分析及原核表达. 张丽丽,徐碧玉,刘菊华,贾彩红,张建斌,金志强. 2017

[19]新型鸭细小病毒NS1基因的原核表达及生物信息学分析. 张经伟,李琦,陈宗艳,宫晓华,李国新,温建新,朱杰,李传峰,刘光清. 2017

[20]尘螨变应原Der f1全序列的原核表达及生物信息学分析. 崔玉宝,周鹏,彭明,彭江龙,周鹰. 2008

作者其他论文 更多>>

微信小程序