睾丸和卵巢打点注射pIRES2-EGFP质粒生产转基因兔的研究(英文)

文献类型： 中文期刊

第一作者： 宋天增

作者： 宋天增;冯静;曾宪垠;杨剑波;杨华;张红琳;杨井泉;韩猛立;贾斌;赵宗胜;石国庆

作者机构：

关键词： 打点注射;睾丸注射;卵巢注射;转基因兔

期刊名称： 西南农业学报

ISSN： 1001-4829

年卷期： 2010 年 23 卷 06 期

页码： 2059-2065

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为探讨直接用注射器对睾丸和卵巢打点注射pIRES2-EGFP质粒转染兔的精子细胞和卵母细胞,建立操作方便、效率高、成本低、可批量生产转基因兔的可行性。选择5只成年新西兰雄兔、29只经产新西兰雌兔,每侧睾丸和卵巢内分别打点注射0.5~0.8 mg/mL质粒0.25 mL。①第3周随机取一只雄兔睾丸做冰冻切片,于荧光显微镜下观察转染情况。②(Ⅰ:1#♂×7♀、Ⅱ:2#♂×7♀、Ⅲ:3#♂×7♀、Ⅳ:4#♂×7♀)其它雄兔于第6周和第7周与3日前做过卵巢注射并超排处理的雌兔配种,最后采集新生仔兔耳组织,提取基因组DNA,经PCR和Southern杂交检测阳性率。结果显示雄兔睾丸冰冻切片于荧光显微镜下可见绿色荧光,统计所得后代转基因阳性率,并进行差异分析,其中Ⅰ组后代阳性率最高,PCR和Southern杂交检测阳性率为93.55%和83.87%,Ⅳ后代阳性率最低,依次为80.65%和70.97%,但是各组之间差异不显著。上述实验结果表明,对睾丸和卵巢同时注射外源基因可获得较高阳性率的转基因后代,生产转基因的方法操作简便、高效,为日后大规模制备一些大型家畜的转基因后代奠定了基础。

分类号： S829.1

  • 相关文献

[1]卵巢打点注射质粒pIRES2-EGFP生产转基因兔的研究(英文). 宋天增,冯静,曾宪垠,杨剑波,杨华. 2010

[2]用注射器直接对睾丸打点注射EGFP生产转基因兔的试验研究. 宋天增,冯静,曾宪垠,杨剑波,杨华,皮文辉,张红琳,贾斌,赵宗胜,郭延华,石国庆. 2010

[3]抗菌肽Thanatin转基因小鼠建立的初步研究. 张鑫,尹逊河,苗向阳,曲朝杰,张秋婷,马艳芳. 2010

[4]小鼠精子形成各阶段转基因效率的研究. 张鑫,苗向阳,尹逊河,马艳芳,曲朝杰,张秋婷. 2009

[5]不同睾丸注射方法对转基因效率的影响. 李翔,戴建军,吴彩凤,张树山,张廷宇,马恒东. 2014

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